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PRUEBAS INMUNOLÓGICAS

 

ANCA (Anticuerpo Anticitoplasma de Neutrófilos):

Ab principalmente tipo IgG, dirigidos contra Ag del citoplasma de los neutrófilos y monocitos.

Se miden por inmunofluorescencia indirecta y por  ELISA, al enfrentar los Ab del suero del paciente a neutrófilos y se clasifican en p-ANCA y c-ANCA.

  • p-ANCA: La letra P es de protoplasmática, en los cuales los Ab anticitoplasma del neutrófilo muestran un patrón de fluorescencia en forma de anillo rodeando el núcleo, siendo el Ag diana por lo general la enzima mieloperoxidasa (MPO).
  • c- ANCA: La letra C es de citoplasmática o clásica, en los cuales los Ab anticitoplasma del neutrófilo muestran un patrón de fluorescencia de distribución difusa o granular en todo el citoplasma, siendo el Ag diana por lo general la proteinasa 3 (PR3).
  • ANCA- atípicos: contra Ag diferentes a MPO y PR3, con patrón de fluorescencia en parches (patrón nevado) y se encuentran en enfermedades autoinmunes asociadas a ANCAs diferentes a las vasculitis.
  • x-ANCA: es posible encontrarlos en enfermedad inflamatoria intestinal.

 

Cuando se realizan por ELISA a los p-ANCA se les llama MPO (por lo de mieloperoxidasa) y a los c-ANCA se les llama PR3 por lo de proteinasa 3.

Cuando se solicitan se debe decir ANCAs por IFI o por ELISA.

Por IFI más sensible y por ELISA más específica.

 

ANAs (Anticuerpos antinucleares):

Se realizan por Inmunofluorescencia indirecta (más sensible y costosa) y por ELISA, consistente en exponer células tumorales de cáncer de mama (células tumorales de la línea HEp-2) al suero del paciente que posee los Ab contra Ag de las células tumorales (Ag que tmb están en las células normales, pero que la célula tumoral las expresa en mayor cantidad). Luego cuando los Ab del paciente están fijados al Ag de la célula tumoral HEp-2 se le agregan Ab (Ig) marcadas con fluoroscopia específicos contra la cadena pesada de los Ab (Ig) del paciente y si están las célula tumoral se ve iluminada.

Los ANA están presentes en la mayoría de las personas, pero están elevadas en solo un 5% y de esos solo la mitad desarrollan enfermedad autoinmune. Se considera título positivo mayor a 1:160 (la mayoría lo tenemos < a 1:80).

Mediante la técnica de IFI en células HEp-2 los patrones ANAs son:

  • Patrón nucleolar: Contra antígenos del nucleolo.
  • Patrón homogéneo: tinción homogénea del núcleo (de importancia clínica).
  • Patrón moteado grueso del núcleo.
  • Patrón moteado fino del núcleo.
  • Patrón periférico o en anillo: se tiñe el borde del núcleo.
  • Patrón centriolar: tiñe los centriolos de las células en división.
  • Patrón citoplasmático: tiñe homogéneo contra antígenos del citoplasma (un contrasentido con el nombre).
  • Patrón mitocondrial.
  • Patrón laminar:
  • Patrón centromérico: tiñen centrómeros  cromosómicos en interfase  (importancia clínica)
  • Patrón de filamentos intermedios o de músculo liso: tiñen el citoesqueleto, llamados tmb anticuerpos anti-musculo liso (positivos > 1:160).

 

Las asociaciones son:

  • El nucleolar: LES, SS y SJögren.
  • El homogéneo y anular: LES
  • El granular grueso: SS limitada.

 

ENAs (Anticuerpos extraíbles del núcleo):

Los principales son:

  • Anti-DNA (1)
  • Anti-Histonas. (1)
  • Anti-Tropoisomerasas.
  • Anti-Centrómero (4).
  • Anti-RNA nuclear (5).
  • Anti-citoplasma.
  • Anti-ribosomas.
  • Anti-Ro (2)
  • Anti-La (2)
  • Scl-70 (6).
  • Anti- Jo (7)
  • Anti-Sm (1)
  • Anti-RNP (3)

 

Realizan diagnóstico así:

  • LES: (1) Anti-DNA, Anti-Histonas y Anti-Sm.
  • Sd. SJögren (2) Anti-Ro, Anti-La.
  • EMTC (3). Anti-RNP
  • Esclerosis sistémica  variedad difusa (4): Anti centrómero.
  • Esclerosis sistémica  variedad limitada (5): Anti- RNA nuclear.
  • Esclerosis sistémica  (6): Scl-70
  • Sd antisintetasa (7): Anti-Jo
  • Los demás ENAs no son específicos.

 

En la práctica en el laboratorio solo reportan el Ro, La, Sm y RNP.

 

Complemento C3 y C4:

El complemento se activa por 3 vías:

1).- Clásica: Generada por Ig y es C1q → C2 → C4 → C3 → MAC

2).- Alterna: Por cualquier causa inflamatoria incluso Ig C3Bb → C3bb → MAC

3).-  Vía manosa.

 

Cuando se activa por inmunocomplejos se activan las dos vías.

Por Ig (Por ejemplo crioglobulinas) solo activa la Clásica.

  • Normal (los itis pueden estar normal)
  • Aumentados ambos: inflamación.
  • C3 ↓ y C4 N: Si hay compromiso renal es una endocarditis o glomerulonefritis postinfecciosa, glomerulopatía primaria membranoproliferativa o muchas enfermedades con depósitos de complejos inmunes.
  • C3 N y C4 ↓:  Crioglobulinas.
  • Disminuidos ambos (C3 ↓  y C4 ↓):   LES o enfermedades de complejos inmunes.

 

AntiDNA:

Se realiza con una tricomona, el cual el Ab del suero se le debe pegar a un quinetoplasto de la tricomona.

 

AntiCCP (Anticuerpo contra Peptido Citrulinado Circular):

Lo importante es que  el péptido citrulinado circular es de síntesis química, pero no de síntesis biológica (no lo poseemos en el organismo), pero se vio que cuando es circular es más sensible que lineal y por eso lo trasformaron.

 

Una vez se sospeche por clínica una enfermedad reumatológica autoinmune del tejido conectivo se debe:

1).- Solicitar ANA.

2).- Si salen positivos luego se piden ENAs.